BINDER C 150 - Manuel (Page 55)

C 150 (E2) 12/2012 Seite 55/90
12. Mesures de référence
Des mesures de référence de la température et du CO
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peuvent être exécutées grâce à un port d'accès
de mesure (8) en silicone au niveau de la porte intérieure. Des mesures de référence de température
sont toujours exécutées en état thermique stable, les portes de l’appareil fermées.
12.1 Mesure de référence CO
2
Souvent, les clients souhaitent pouvoir effectuer des tests de mesure entre les réglages faisant partie des
opérations d'entretien annuel recommandées. En principe, il y a trois possibilités de tester la concentra-
tion de CO
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dans un incubateur. Elles sont décrites dans les chapitres 12.1.1 à 12.1.3.
12.1.1 Mesure indirecte de la concentration deCO
2
par le pH du milieu
Il est possible de déterminer la concentration de CO
2
dans la chambre indirectement par la valeur pH du
milieu. C'est une méthode simple pour tester la concentration de CO
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sans de l'équipement de mesure
spécifique. En effet, seul un indicateur pH ou une électrode de mesure pH est nécessaire, dont il s'agit
d'équipement standard des laboratoires de culture de cellules.
Cette méthode n’est pas appropriée pour le calibrage du système de détecteurs FPI BINDER.
Cette méthode se base sur l'équilibre acide/base du système tampon dans le bouillon de culture.
Les bouillons de culture marchands sont tamponnés par NaHCO
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. À l'aide de la valeur pH du milieu, on
peut donc déterminer la concentration de CO
2
. Figure 27 vous donne l'interrelation entre la concentration
de CO
2
en vol. % et le pH de différents milieux tamponnés NaHCO
3
.
Procédé recommandé :
•
Incubez un échantillon pour une demi-journée dans les mêmes conditions que celles de la culture des
cellules. Utilisez une bouteille de culture de cellule ou un flacon à couvercle ouvert de 50 ml.
• Après le gazage, retirez l'échantillon de l'incubateur et mesurez la valeur pH à l'aide d'une électrode
de gaz dans les 5 minutes qui suivent.
Pendant la mesure, veillez à ce que le milieu soit le moins possible en contact avec l'air ambiant, pour
une diffusion lente du gaz. Un mouvement significatif vers le bas ne pourra être observé qu’après les
5 minutes.
Il va sans dire qu'on peut utiliser les bandelettes de test pH (plage pH 6 à 8, sans purge).
4
6
8
10
12
14
16
18
2
3,70 g/l NaHCO
3
2,20 g/l NaHCO
3
0,85 g/l NaHCO
3
6.8 7.0 7.2 7.4 7.6
Valeur pH
Vol.% CO 2
0,35 g/l NaHCO
3
1,20 g/l NaHCO
3
Dénomination commerciale
des bouillons de culture:
DMEM
BME
MEM
Medium 199
Mc Coy
F10
F12
NaHCO
3
[g/l]
3,70
2,20
2,20
2,20
2,20
1,20
1,20
Figure 27: Valeur pH des bouillons courants de culture, tamponnés par NaHCO
3
en fonction de la con-
centration de CO
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