Leica Biosystems PELORIS_PELORIS II - Manuel (Page 80)

Installation du réactif
Leica PELORIS Manuel d’utilisation Rév K © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2011 80
5.1.5 Coloration des tissus
Certains laboratoires ont traditionnellement ajouté de l'éosine (ou d'autres teintures) au formol ou à
l'alcool durant le traitement des tissus pour faciliter leur visualisation pendant l'inclusion. Cette
pratique n'est PAS recommandée pour le préparateur de tissu Peloris. Les teintures peuvent
s'accumuler sur les détecteurs de niveau du liquide et compromettre la performance. Si vous avez
besoin de colorer les tissus pour l'inclusion, Leica Microsystems vous conseille d'ajouter la teinture à
l'étape de macroscopie.
Toutefois, si le client a de fortes raisons d'utiliser de l'éosine sur le préparateur Peloris, il peut le
faire à condition d'agir avec une extrême prudence. En pareil cas, il convient d'ajouter la teinture au
fixateur plutôt qu'à l'alcool. Des temps d'exécution rapides peuvent signifier que le tissu est à
l'étape de macroscopie seulement pendant une courte durée et les étapes de fixation sur le Peloris
peuvent aussi être courtes. Pour cette raison, certains clients préfèrent ajouter l'éosine à l'étape
d'alcool. Cette procédure est aussi acceptable si elle est exécutée avec prudence.
Les concentrations recommandées d'éosine pour les différentes étapes sont données ci-dessous.
Les essais ont été réalisés en utilisant Surgipath Alcoholic Eosin (éosine alcoolique Surgipath) (1%)
- référence catalogue nº 3801600.
Préférence 1 - À la macroscopie
Utilisez 10 ml de 1 % d'éosine liquide par litre de formol.
Vous pouvez varier la concentration en fonction de la durée du protocole de traitement,
pendant lequel une quantité de teinture sera perdue. L'inconvénient d'une coloration à l'étape
de macroscopie est que les spécimens ne sont pas immergés dans le formol teinté pendant la
même durée.
Préférence 2 - Dans du fixateur sur le Peloris
Utilisez 50 ml de 1 % d'éosine liquide par flacon de réactif Peloris 5 L de formol.
Préférence 3 - Dans de l'alcool sur le Peloris (xylène)
Utilisez 10 ml à 25 ml de 1 % d'éosine liquide par flacon de réactif 5 L Peloris d'éthanol (il y a huit
flacons d'éthanol dans la configuration de flacons recommandée pour le traitement au xylène).
Les spécimens sont immergés dans le réactif de coloration pendant la même durée, ce qui permet
d'obtenir une coloration homogène. Les protocoles de plus de deux heures peuvent entraîner une
sur-coloration - il convient de réduire la concentration d'éosine si nécessaire.
Se référer à
Si de l'éosine est ajoutée aux réactifs sur le peloris, assurez-vous de nettoyer les
étuves quotidiennement pour eviter l'accumulation de teinture sur les détecteurs de
niveau de liquide, car elle peut compromettre la performance. Se Nettoyer les étuves
dans 7.2 Tâches quotidiennes.