Eppendorf BioSpectrometer kinetic - Manuel (Page 37)

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Méthodes
Eppendorf BioSpectrometer ® kinetic
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Dye labels
• Pour les biomolécules marquées au colorant : détermination de la concentration de la biomolécule
(acide nucléique ou protéine) par une mesure effectuée à 260 ou 280 nm et du colorant au cours d'une
mesure.
• Évaluation avec facteur. Outre la biomolécule, il est possible de mesurer parallèlement jusqu'à deux
colorants à deux différentes longueurs d'onde.
• Par ailleurs, évaluation de la fréquence d'incorporation du colorant (FOI). Sélection entre deux
différents procédés de calcul FOI.
• Méthodes déjà pré-programmées : ssDNA, marquées avec Cy 3 ou Cy 5.
• Il est possible de corriger l'influence du spectre de colorants sur la justesse de la mesure de la
biomolécule.
• Correction partielle de la turbidité possible à l'aide du paramètre Background.
• Informations complémentaires sur la pureté des substances mesurées : rapport A260/A280 et rapport
A260/A230 (valeurs du rapport limitées aux acides nucléiques), spectre de longueurs d'onde
d'absorbance.
• Lors de la programmation de la méthode, il suffit de sélectionner la biomolécule et le colorant dans des
listes prescrites pour importer différents paramètres pertinents comme les longueurs d'onde de mesure
et les facteurs d'évaluation. Ces paramètres sont définis séparément dans les fonctions du groupe
Gen.
method param. Différents acides nucléiques, protéines et colorants sont pré-programmés dans Gen.
method param.. Vous pouvez ajouter d'autres acides nucléiques, protéines et colorants.
• Ne concerne que les acides nucléiques marqués : il est possible de convertir les concentrations en
concentrations molaires et (après la saisie du volume d'échantillon) en quantités d'acide nucléique et de
colorant (étape :
process results).
Bacterial density
• Mesure de la turbidité pour déterminer la densité bactérielle.
• La mesure à 600 nm est déjà pré-programmée.
• Informations complémentaires : spectre de longueurs d'onde d'absorbance.
6.2.3 Groupe de méthodes Basic
Factor, standard
• Mesure effectuée à une longueur d'onde et évaluation avec facteur ou standard.
• Les méthodes d'évaluation avec facteur ou standard sont pré-programmées.
Calibration curve
• Mesure effectuée à une longueur d'onde suivie de l'évaluation avec une série de 2 à 12 standards.
• Différents procédés d'évaluation ("Curve fit") comme régression linéaire, régression non linéaire sont
proposés.
• Affichage des résultats standards sous forme de graphique ou de tableau.
• Possibilité d'utilisation de la dernière évaluation standard enregistrée.
• Une méthode est pré-programmée pour l'évaluation avec courbe standard.