Eppendorf BioSpectrometer kinetic - Manuel (Page 107)

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Procédés d'évaluation
Eppendorf BioSpectrometer ® kinetic
Français (FR)
12.5 Procédés d'évaluation spéciaux pour acides nucléiques et protéine UV
Ce chapitre est consacré à l'évaluation des acides nucléiques et/ou protéines contenues dans les groupes
Nucleic acids et Proteins direct UV ainsi que des composants de la biomolécule correspondants du
groupe
Dye labels.
12.5.1 Correction A
260
et correction A
280
Application : correction de l'influence de l'absorbance du colorant sur l'absorbance de l'acide nucléique et/
ou des protéines à 260 et 280
nm, dans les méthodes du groupe Dye labels.
L'application du procédé d'évaluation peut être activée dans les paramètres Correct A260 et Correct A280.
A
XXX, corr
= absorbance corrigée par calcul, à la longueur d'onde de 260 nm ou 280 nm
A
XXX
= absorbance mesurée à la longueur d'onde de 260 nm ou 280 nm
CF = facteur de correction pour la longueur d'onde de 260 nm ou 280 nm (les deux facteurs de correction
utilisées à 260 nm et 280 nm sont spécifiques à un colorant et sont programmés dans General Method
Parameter: Dyes dans la partie Functions).
A
YYY
= absorbance mesurée à la longueur d'onde du colorant.
12.5.2 Rapport A260/A280 et rapport A260/A230
Application : informations sur la pureté de l'acide nucléique mesurée. L'application du procédé
d'évaluation peut être activée dans les paramètres
A260/280 et/ou A260/A230.
"Ratio" désigne le quotient des absorbances mesurées aux longueurs d'onde désignées.
Valeurs indiquées dans la littérature pour les rapports définis avec des acides nucléiques purs :
A260/A280
• ADN : 1,8 à 1,9
• ARN : 1,9 à 2,0
(Current Protocols in Molecular Biology, 1994)
Informations complémentaires sur la pureté des substances mesurées : rapport A260/A230 et rapport
A260/A230 (valeurs du rapport limitées aux acides nucléiques), spectre de longueurs d'onde
d'absorbance.
Les valeurs d'absorbance représentées dans les affichages des résultats sont les valeurs
d'absorbance mesurées directement, sans correction.
YYY XXX corr XXX
A CF A A u 
,