Hoefer HE99X - Manuel (Page 19)

2. 10X Tris-phosphate-EDTA (TPE) de
bouillon de buffera
a
(0,89 M Tris, l’acide phosphorique 0,89 M,
EDTA 20 mM, pH ~8,1, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1)
0,89 M 108,0 g
L’acide phosphorique (85%) 0,23 M 15,5 ml
EDTA solution 0,02 M 40,0 ml
(0,5 M, pH 8,0, solution 4)
Déminéralisée H
2
O à 1000,0 ml
Incorporer. Ne pas ajuster le pH. Diluer jusqu’à 1X,
pour donner 89 mM Tris base, 23 mM d’acide phos-
phorique, et 2 mM d’EDTA.
3. 10X Tris-acétate-EDTA stock tampon (TAE) a
(0,4 M Tris, 0,2 M d’acide acétique, EDTA 10 mM,
pH ~8,4, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1)
0,40 M 48,4 g
L’acide acétique (99,5%) 0,20 M 11,4 ml
EDTA solution
(0,5 M, pH 8,0, solution 4) 0,01 M
20,0 ml
Déminéralisée H
2
O à 1000,0 ml
Incorporer. Ne pas ajuster le pH. Diluer jusqu’à
1X avant utilisation pour obtenir 40 mM Tris base,
20 mM d’acide acétique, et 1 mM d’EDTA.
4. EDTA (acide éthylènediaminetétraacétique) b
(0,5 M, pH 8,0, 100 ml)
Na
2
EDTA·2H
2
O, (FW 372,2) 0,5 M 18,6 g
Déminéralisée H
2
O à 70,0 ml
NaOH (10 M) à pH 8,0 ~5,0 ml
Déminéralisée H
2
O à 100,0 ml
a Sambrook J. and Russell, D.W., (2001) Molecular Cloning: A Labora-
tory Manual, A1.17
b Current Protocols in Molecular Biology (1993) A.2.1
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