Hoefer SE640 - Manuel (Page 43)

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Gel recettes
Les recettes de gel sont Laemmli de 30 ml d’une
solution de concentration unique (pour deux
1,5 mm, 18 × 8 gels cm). Sous forme de tableau
sont des ingrédients et des volumes pour des
gels pores relativement grands (7,5-10% de la
plage T) ainsi que les petites gels pores (de 12,5
à 15% de la plage T). Un gel à 4% d’empilage
est commun. La recette est dégradé linéaire
de 100 ml de solution. Le volume total néces-
saire dépend du nombre de suffrages gels et de
l’épaisseur du gel; ajuster si nécessaire. Tous les
gels sont réticulées avec 2,6% C.
Laemmli gel
(par une solution à 30 ml de gel résoudre, 5 ml de solution de gel d’empilement)
Séparation du gel Empilement
de gel
7,5% 10% 12,5% 15% 4%
Acrylamide stock (Solution #1) 7,5 ml 10,0 ml 12,5 ml 15,0 ml 0,67 ml
1,5 M TrisCl, pH 8,8 (Soln, #2) 7,5 ml 7,5 ml 7,5 ml 7,5 ml —
0,5 M TrisCl, pH 6,8 (Soln, #3) — — — — 1,25 ml
10% SDS (Solution #4) 0,3 ml 0,3 ml 0,3 ml 0,3 ml 0,05 ml
Désionisée H
2
O 14,6 ml 12,1 ml 9,6 ml 7,1 ml 3,00 ml
10% APS (Solution #5) 150 µl 150 µl 150 µl 150 µl 25 µl
TEMED 10 µl 10 µl 10 µl 10 µl 2,5 µl
Volume final 30,0 ml 30,0 ml 30,0 ml 30,0 ml 5,0 ml