Hoefer SE640 - Manuel (Page 39)

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Le pour cent total de l’acrylamide (% T) dans
le gel de résolution, qui peut varier de 5 à 20%,
détermine la taille des pores. Couramment, la
quantité de réticulant utilisé (% C) est de 2,6%.
Dans le système exemple suivant, la composition
de gel de résolution est de 10% T, 2,6% de C,
qui se traduit par une taille de pore moyenne.
La composition de gel d’empilement est T 4%,
2,6% C. Le T% dans le gel d’empilement est
inférieur à cause une taille plus grande est req-
uise des pores.
Les concentrations finales
Séparation du gel Gel d’empilement Tampon d’électrophorèse
Acrylamide conc. 10% T*, 2,6% C 4% T, 2,6% C
Tris-Cl 0,375 M 0,125 M
Tris-Glycine 0,025 M Tris base
0,192 M glycine
pH 8,8 6,8 ~8,3
SDS 0,1% 0,1% 0,1%
Persulfate d’ammonium (APS) 0,05% w/v 0,05 – 0,1% w/v
TEMED † 0,05% v/v 0,05 – 0,1% v/v
* Pour atteindre une autre concentration finale désirée, ajuster les volumes d’achat d’actions d’acrylamide et de l’eau.
Les volumes pour les différentes concentrations sont indiquées à la page 35.
† Tetramethylethylenediamine