Luminex FLEXMAP 3D Hardware User Manual - Manuel (Page 23)

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CHAPITRE 2
Présentation technique
Ce chapitre aborde les aspects techniques du système FLEXMAP 3D de Luminex :
fonctionnement, composants du système, sous-systèmes, matériel supplémentaire
recommandé et caractéristiques.
Comment fonctionne le système
FLEXMAP 3D ?
Combiné avec la technologie xMAP® (profilage multi-analytes), le système FLEXMAP 3D,
permet de mesurer simultanément jusqu'à 500 analytes à partir d'un seul échantillon. En
intégrant des microbilles, des procédés de coloration propriétaires, des circuits de fluides
s'appuyant sur la cytométrie en flux, des lasers ainsi que les dernières méthodes de
lecture à haute vitesse de signaux numériques et des algorithmes informatiques avancés,
la technologie xMAP forme un système la détection multi-analytes démontrant une
excellente sensibilité et spécificité.
Un procédé propriétaire établi créé par Luminex pour la coloration interne des microbilles
en polystyrène de même taille avec des fluorophores multiples afin de faciliter la création
de cinq cents microbilles reconnaissables lorsque ces fluorophores sont combinés en
concentrations variées. Les microbilles, différenciées par couleur, sont excitées par deux
lasers dans l'instrument FlexMAP 3D. L'émission qui en résulte est détectée par une des
photodiodes à avalanche (APD) dans trois canaux de classification (CL1, CL2 et CL3) qui
sont ensuite analysés à l'aide d'une APD différente dans un canal de discrimination de
doublets (DD), qui mesure la taille des billes par dispersion.
Les analytes sont liés aux microbilles xMAP au moyen de la même chimie de surface que
celle utilisée par les instruments Luminex plus anciens (LX100/200). Des rapporteurs,
identifiés à l'aide de marqueurs fluorescents excités à des longueurs d'onde différentes de
celles des colorants internes, se lient à l'analyte d'intérêt et sont détectés par un tube
photomultiplicateur (PMT) dans un canal rapporteur (RP1), permettant une analyse
quantitative. À mesure que les microbilles passent rapidement dans le courant liquide à
travers les rayons laser, le signal numérique haute vitesse et les algorithmes
informatiques différencient les analytes transportées sur chaque microbille et quantifient la
réaction à partir du signal du rapporteur fluorescent. Les résultats sont analysés par le
logiciel du système et présentés dans format lisible pour analyse.