Hoefer HE33 - Manuel (Page 21)

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1. 10X Tris-borate-EDTA stock tampon (TBE) †
(0,89 M Tris, 0,89 M d’acide borique, 20 mM EDTA,
pH ~8,2, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1) 0,89 M 108,0 g
L’acide borique (FW 61,8) 0,89 M 55,0 g
EDTA solution
(0,5 M, pH 8,0, solution 3)
0,02 M 40,0 ml
Déminéralisée H
2
O à 1000,0 ml
Incorporer. Ne pas ajuster le pH. Avant d’utiliser soit
pour diluer: 0.5X, pour donner 45 mM Tris base,
45 mM d’acide borique, et 1 mM d’EDTA. Cette
dilution est souvent utilisé car le courant reste faible,
donc moins de chaleur.
-Ou-
1X, pour donner 89 mM de Tris base, 89 mM d’acide
borique, et 2 mM d’EDTA.
2. 10X Tris-acétate-EDTA stock tampon (TAE) †
(0,4 M Tris, 0,2 M d’acide acétique, EDTA 10 mM,
pH ~8,4, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1) 0,40 M 48,4 g
L’acide acétique (99,5%) 0,20 M 11,4 ml
EDTA solution
(0,5 M, pH 8,0, solution 3)
0,01 M 20,0 ml
Déminéralisée H
2
O à 1000,0 ml
Incorporer. Ne pas ajuster le pH. Diluer jusqu’à
1X avant utilisation pour obtenir 40 mM Tris base,
20 mM d’acide acétique, et 1 mM d’EDTA.
3. EDTA (acide éthylènediaminetétraacétique) †
(0,5 M, pH 8,0, 100 ml)
Na
2
EDTA·2H
2
O, (FW 372,2) 0,5 M 18,6 g
Déminéralisée H
2
O à 70,0 ml
NaOH (10 M) à pH 8,0 ~5,0 ml
Déminéralisée H
2
O à 100,0 ml
† Modification de Sambrook, J., Molecular Cloning: A Laboratory Manual,
p. B.23 (1989). Voir aussi Current Protocols in Molecular Biology,
p. A.2.1 (1993).