Hoefer SE215 - Manuel (Page 12)

gel nécessaire taille fabricant
caster vol. gamme (ml) de gradient*
SE215 55–100 SG100
SE235 32–56 SG50 ou SG100
SE275 22–40 SG30 ou SG50
*Taille réelle dépend du volume calculé.
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Préparer des solutions
Solution Plug
Préparer la solution de prise assez (50% de saccha-
rose ou de glycérol 75% dans un tampon 1X gel
de séparation) pour remplir l’espace ci-dessous les
sandwichs. Le SE215 nécessite environ 30 ml et
le SE235 SE275 ou nécessite environ 15 ml. La
solution prise est pompé dans après le gradient de
déplacer l’ensemble de la solution de monomère dans
la pile en sandwich.
Facultatif: Ajouter du bleu de bromophénol pour
aider à suivre la fiche comme elle est pompée dans le
lanceur de sorts de gel multiples.
Solution de monomère
Suivre les instructions de la page 6, étape 1 pour
le calcul du volume total de solution de monomère
nécessaire. Diviser le volume total dans la moitié et
la préparation de ce volume de chacune des solutions
supérieures et inférieures% d’acrylamide.
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Verser le «lourd» solution dans la chambre du réser-
voir (la chambre la plus éloignée de la sortie). Ouvrir
le robinet assez longtemps pour déplacer l’air dans
la connexion entre les chambres et puis sur Fermer.
Remplissez la solution de la lumière dans la chambre
de mélange et placer une barre d’agitation dans cette
chambre. Placez la machine à gradient sur un agita-
teur magnétique et commencer agitation à une vitesse
telle qu’elle n’introduit pas de bulles dans la solution.
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p10
Remarque: 15% de saccharose
solide (w/v) ou de glycérol 25%
(p/v) dans le «lourd» solution
minimise le mélange et la
stratification gradient aides.