Eppendorf D30 BioPhotometer - Manuel (Page 81)

81
Procédés d'évaluation
Eppendorf BioPhotometer ® D30
Français (FR)
Valeurs indiquées dans la littérature pour les rapports définis avec des acides nucléiques purs :
A260/A280
• ADN : 1,8 à 1,9
• ARN : 1,9 à 2,0
(Current Protocols in Molecular Biology, 1994)
Informations complémentaires sur la pureté des substances mesurées : rapport A260/A230 et rapport
A260/A230 (valeurs du rapport limitées aux acides nucléiques), spectre de longueurs d'onde
d'absorbance.
Pour le rapport A260/A230, on trouve différentes valeurs d'acide nucléique purs dans la littérature :
• ADN : 2,3 à 2,5
(The Nucleic Acids, 1955)
• ADN : 1,9
(Current Protocols in Molecular Biology, 1994)
Les valeurs varient fortement suivant le pH. C'est pourquoi, les acides nucléiques ne devraient pas être
mesurés dans l'eau, mais dans un tampon à un pH compris entre 7 et 7,2 (par ex. tampon TE).
12.5.2 Conversion en concentrations molaires et quantités d'acides nucléiques
La conversion ne peut être appliquée qu'aux acides nucléiques. Elle a lieu dans l'étape process results/
More calculations.
12.5.2.1 Calcul de la quantité
Application : calcul de la quantité (masse) d'acide nucléique dans le volume d'échantillon total.
M = quantité totale calculée (masse) d'acide nucléique dans le récipient de réaction. Unité : μg.
C = concentration d'acide nucléique calculée à partir de la mesure. Unité : μg/mL ou ng/μL.
V
P, total
= volume total d'échantillon contenu dans le récipient de réaction. Entrez cette valeur dans More
calculations. Unité : μL.